脊尾白虾血细胞ESTs的生物信息学与微卫星序列特征分析

对前期测序得到的脊尾白虾血细胞2853条EST序列进行了生物信息学和微卫星序列特征分析。EST序列拼接得到1053条Unigenes,包括329条Contigs和724条Singlets。BLAST分析表明,593(56.3%)条Uingenes与数据库中已知基因具有相似性。KEGG代谢途径分析表明,181条Unigenes映射到120条代谢途径。通过EST-SSR分析,共得到416条微卫星序列,检出率为14.58%。其中,两碱基重复序列374条,占89.90%,AG重复类型最多;三碱基35条,占8.41%,AAT重复类型最多;四碱基7条,占1.68%,AAGT重复类型最多。本研究可为脊尾白虾功能基因资源挖掘及分子标记筛选提供有效数据。     

盐度波动和中草药制剂对脊尾白虾存活·生长和免疫的影响(摘要)(英文)

[目的]为大规模脊尾白虾的养殖提供理论基础。[方法]研究了盐度波动幅度(S0、S3、S6和S9分别代表盐度波动幅度为0、3、6和9)和中草药制剂(0、1%、2%和4%)对脊尾白虾存活、生长和免疫的影响,实验周期60d。试验数据用双因素方差分析、Turkey’s多重比较以及回归分析进行处理。[结果]1%中草药和S6盐度波动处理组脊尾白虾的特定生长率、饲料转换效率和超氧化物歧化酶活性均高于其他处理,且显著高于同一中草药添加水平的S0,S3和S9盐度波动处理组。回归分析表明,在S0、S3和S63个盐度波动水平,随盐度波动幅度的增加,饲料中中草药制剂的最适添加量呈下降趋势,分别为2.74%、1.77%和0.51%;在4个中草药制剂添加水平,随饲料中中草药制剂添加量的增加,脊尾白虾生长的最适盐度波动幅度呈下降趋势,分别为5.26、4.95、3.54和1.97。[结论]盐度、中草药制剂及其相互作用对脊尾白虾的存活、生长和免疫均有显著影响,因此在养殖时应加以注意。     

脊尾白虾全人工繁育技术初步研究

脊尾白虾是我国沿海地区池塘养殖重要品种,但目前尚未实现全人工繁育,严重制约了产业进一步发展。选取野生脊尾白虾作为亲虾,经过越冬培育、促熟交尾、幼体孵化培育、仔虾选育等手段,进行了脊尾白虾全人工繁育技术研究。试验结果显示,在盐度31.3、水温18.1~26.2℃、pH 8.1条件下,室内越冬脊尾白虾亲虾可成功培养至性腺成熟,并交尾抱卵,平均抱卵率达70%,平均孵化率为61.02%。幼体最佳培育密度20尾/L,仔虾适宜养殖密度0.13~0.53尾/L,培育至2cm时存活率可达80%,继续培育3个月后发育至性成熟。一年可繁殖2~3代。在此基础上建立了脊尾白虾近交家系,现已培育至第6代,各家系繁殖力、生长速度和存活率均未出现近交衰退现象。本研究初步解决了脊尾白虾室内全人工繁育技术,并为试验动物培育奠定了良好的技术基础。     

萘对脊尾白虾存活、免疫和能量分配的影响

本文以室内暂养7 d的脊尾白虾为试验对象,探讨萘对脊尾白虾存活、免疫和能量分配的影响试验。结果表明,萘的24、48、72、96 h半致死浓度分别为7.97、7.08、6.08、5.30 mg/L,安全浓度为1.67 mg/L。萘对脊尾白虾血清酚氧化酶和超氧化物歧化酶的活性有显著影响,细胞能量分配为(-5 928.00±964.13)mJ/(mg·h湿重)。说明萘对脊尾白虾的免疫能力有着较严重的抑制效应,同时可以降低脊尾白虾的能量代谢。     

维拉帕米对脊尾白虾体内恩诺沙星代谢及消除的影响

为了解维拉帕米对恩诺沙星在脊尾白虾体内代谢及消除的影响,在水温(18.1±0.5)℃条件下,对照组每天以10mg/kg体重剂量连续7天投喂脊尾白虾恩诺沙星,维拉帕米组在投喂恩诺沙星的同时以4 mg/L剂量药浴脊尾白虾维拉帕米,比较了维拉帕米组和对照组中恩诺沙星及其代谢物环丙沙星的浓度变化与消除动力学统计矩参数。结果显示,肝胰腺、肌肉、和鳃3种组织中的恩诺沙星浓度均随时间呈规律性递减,维拉帕米组3种组织中的恩诺沙星浓度、AUC和t1/2β均高于对照组(P0.05),而维拉帕米组各组织中的环丙沙星的浓度和AUC却显著低于对照组(P0.05);维拉帕米组3种组织中恩诺沙星和环丙沙星的β、CL均显著小于对照组(P0.05)。结果表明,维拉帕米抑制了脊尾白虾体内恩诺沙星的代谢及消除速率。     

脊尾白虾水通道蛋白基因4和11在碱度胁迫过程中的作用

水通道蛋白(aquaporin)是一种细胞膜上特异性转运水分子及其他中性代谢分子的膜蛋白家族,对生物的细胞内外渗透压稳定具有重要的调节作用。为了了解水通道蛋白在脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)应对碱度胁迫中的作用,本研究利用RACE技术成功克隆了脊尾白虾水通道蛋白4 (aquaporin 4, EcAQP4)与水通道蛋白11 (aquaporin 11, EcAQP11)基因cDNA全长,EcAQP4基因的开放阅读框为621 bp,编码206个氨基酸,预测分子量为21.673 kDa,理论等电点为8.30,为疏水性蛋白,具有5个跨膜结构域;EcAQP11基因的开放阅读框长度为783 bp,编码260个氨基酸,预测蛋白分子量为28.490 kDa,理论等电点为5.40,为疏水性蛋白,具有4个跨膜结构域。序列比对结果显示,EcAQP4基因与罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)同源性最高,为94.63%;EcAQP11与斑节对虾(Penaeus monodon)同源性最高,为81.47%。为验证水通道蛋白的功能,利用RNA干扰技术特异性沉默EcAQP4和EcAQP11基因,结果显示,碳酸盐碱度胁迫后,注射干扰后的脊尾白虾死亡率显著升高,EcAQP4干扰组72 h死亡率达到45%,EcAQP11干扰组72 h死亡率达到55%,与对照组差异显著(P<0.05)。同时发现,EcAQP4干扰组在碳酸盐碱度胁迫24、48与72 h时的血液渗透压变化幅度显著高于对照组(P<0.05),72 h时渗透压显著升高(P<0.05);EcAQP11干扰组血液渗透压在3个时间点均显著升高(P<0.05)。以上结果表明,水通道蛋白在脊尾白虾应对碱度胁迫过程中起到了调节渗透压、维持体内外离子平衡的作用。     

氨态氮和pH对脊尾白虾氮磷代谢的影响

[目的]分析氨态氮和pH对脊尾白虾氮磷代谢的影响,以期为脊尾白虾对环境的适应情况及抗逆机制的研究提供资料。[方法]采用人工改变自然海水氨态氮浓度和pH,研究水族箱中氨氮和磷酸盐浓度在密闭2 h前后的差异。[结果]氨态氮处理组,随着NH4Cl浓度的增加,脊尾白虾的氮磷代谢均呈现下降的趋势,急变组的幅度大于缓变组;pH处理组,当pH8.4时或pH7.8,脊尾白虾的氮磷代谢均随着pH的上升或下降呈现下降趋势,急变组的幅度大于缓变组。[结论]氨态氮和pH均降低了脊尾白虾的代谢水平,急变比缓变显著。     

低盐和低温对脊尾白虾生长和能量收支的影响

研究了低盐和低温对脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda Holthuis)生长和能量收支的影响,实验周期60d。结果表明,随盐度的升高,脊尾白虾存活率、特定生长率、摄食量和饲料转换效率呈上升趋势;随温度的升高,白虾特定生长率、摄食量和吸收效率呈上升趋势,而饲料转换效率呈下降趋势。能量分配中,呼吸能的支出最大,占摄食能的68.78%~74.91%;其次是排粪能和生长能部分,分别占摄食能的10.23%~13.24%和6.97%~13.24%;排泄能和蜕壳能是能量支出中较小的部分,分别占摄食能的4.61%~5.56%和0.63%~0.73%。随盐度的升高,脊尾白虾生长能占摄食能的比例呈上升趋势,而排泄能和排粪能占摄食能的比例呈下降趋势。随温度的升高,白虾生长能和排粪能占摄食能的比例呈下降趋势,而呼吸能和排泄能占摄食能的比例呈上升趋势。     

脊尾白虾的幼体发育

在实验室的条件下，对脊尾白虾幼体发育的全过程进行观察和研究。当水温保持在22℃，饵料充足的情况下，幼体自卵孵出后，有规律的每二天蜕皮一次。潘状幼体共蜕皮6次，分六个潘状幼体期，约经12天，即变态为仔虾。本文对各期幼体形态结构的变化作详细的描述，并有附图说明。     

脊尾白虾杆状病毒病研究

脊尾白虾是一种野生的经济虾类，广温，广盐，杂食性，分布面极广，繁殖季节长。我们已在其病虾的肌肉，中肠等组织中发现Ｃ亚群杆状病毒，其形态结构及宿主的细胞病理学特征均与引起中国对虾，长毛对虾，日本对虾等养殖对虾病毒性流行病的Ｃ亚群杆状病毒类同。由此认为，脊尾白虾是我国养殖对虾病毒性流行病病原的常年媒介体。